AID EliSpot Assay Methode
Nachweis freigesetzter Zytokine
Abbildung einzelner T-Zellen und deren Zytokinproduktion
Die Durchführung des Assays erfolgt in einer Riegel- und Multitestplatte, wobei der Boden eines jeden Wells mit Antikörpern gegen das nachzuweisende Zytokin beschichtet ist. Zur Aktivierung der T-Zellen wird ein Antigen/Mitogen und PBMC's in jedes Well pipettiert.
Durch das Antigen stimulierte T-Zellen produzieren Zytokine, die durch die Antikörper gebunden werden.
Die Detektion der freigesetzten Zytokine erfolgt durch eine Farbreaktion mittels eines zweiten konjungierten Antikörpers und eines Chromogens.
Jeder einzelne Spot bildet die Aktivierung einer einzelnen T-Zelle und deren Zytokinproduktion ab.